Күзәнәк туры RT qPCR комплекты - Такман туры күзәнәк лизис күзәнәкләре әзер Бер адымлы qRT-PCR комплектлары
Тасвирламалар
Бу продукт уникаль лизис буфер системасын куллана, РТ-qPCR реакцияләре өчен культуралы күзәнәк үрнәкләреннән тиз чыгару, күп вакыт таләп итә торган һәм РНК чистарту процессын юкка чыгару, һәм кирәкле RNA шаблонын алу өчен 7 минут кына, комплект белән тәэмин ителгән 5 × туры RT Mix, 2 × туры qPCR Микс-Такман реаль вакытта санлы PCR нәтиҗәләрен ала ала.
5 × Туры РТ Микс һәм 2 × Туры qPCR Микс-Такман ингибиторның толерантлыгына ия һәм шаблон рәвешендә үлчәү үрнәгенең лизатасын кулланып эффектив кире һәм конкрет көчәйтү эшләрен башкара ала.Реагентта Foregene Reverse Transcriptase, Hot D-Taq DNA полимерасы, dNTP, MgCl бар2, Reaction Buffer, PCR Оптимизатор һәм Стабилизатор, алар лизис буферы белән үрнәкләрне тиз һәм җиңел табу өчен кулланыла ала, һәм югары сизгерлек, үзенчәлек һәм тотрыклылык үзенчәлекләренә ия.
Характеристикалар
200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns
Комплект компонентлары
| QuickEasyTMКүзәнәк туры RT-qPCR Кит-Такман | ||||
| Комплект компонентлары 20μl qPCR реакция системасы | DRT-01021 | DRT-01022 | Тамга | |
| 200 Т. | 1000 Т. | |||
|
Partлеш I | Буфер КЛ | 4 мл | 20 мл | Лизис күзәнәге |
| Foregene Protease Plus II | 80 μл | 400 μл | ||
| Буфер СТ | 400 μл | 1 мл × 2 | ||
|
Partлеш II | ДНК Эразер | 80 μл | 400 μл | |
| 5 × Туры РТ Микс * | 160 μл | 800 μл | RT | |
| 2 × туры qPCR Микс-Такман * | 1 мл × 2 | 1,7 мл × 6 | qPCR | |
| 20 × ROX сылтама буяу | 40 μл | 200 μл | ||
| RNase-ddH2O | 1,7 мл | 10 мл | ||
| Инструкция кулланмасы | 1 кисәк | 1 кисәк | ||
*:Кәрәзле Лизис, 5 × Туры РТ Микс, 2 × Туры qPCR Микс-Такманны аерым сатып алып була
Featuresзенчәлекләр һәм өстенлекләр
■Гади һәм эффектив: Cell Direct RT технологиясе ярдәмендә РНК үрнәкләрен 7 минут эчендә алырга мөмкин.
Demand ampleрнәк сорау кечкенә, чөнки 10 күзәнәк сынап карарга мөмкин.
■ putгары үткәрү: ул 384, 96, 24, 12, 6 кое тәлинкәләрдә культуралы күзәнәкләрдә РНКны тиз таба ала.
■ ДНК Эразеры чыгарылган геномнарны тиз арада бетерә ала, алдагы эксперимент нәтиҗәләренә йогынтысын киметә ала.
RT Оптимальләштерелгән RT һәм qPCR системасы ике этаплы RT-PCR кире транскрипцияне эффективрак һәм PCR конкретрак итә, һәм RT-qPCR реакция ингибиторларына чыдамрак итә.
Комплект кушымтасы
Куллану күләме: культуралы күзәнәкләр.
- Лизис үрнәге белән чыгарылган РНК: бу комплектның RT-qPCR шаблонына гына кагыла.
- Комплектны түбәндәге максатларда кулланырга мөмкин: ген экспрессиясен анализлау, siRNA-арадашлы ген сүндерү эффектын тикшерү, наркотиклар тикшерү һ.б.
Саклау һәм саклану вакыты
Бу комплектның I өлеше 4тә сакланырга тиеш℃;II өлеш -20 at сакланырга тиеш.
Foregene Protease Plus II 4тә сакланырга тиеш℃, -20 at туңмагыз.
Реагент 2×Туры qPCR Микс-Такман -20 сакланырга тиеш℃караңгыда;еш кулланылса, аны 4 тә сакларга мөмкинShort кыска вакытлы саклау өчен (10 көн эчендә кулланыгыз).
Real Time PCR праймериз принциплары
Алга пример һәм кире пример
Real Time PCR өчен праймериз дизайны бик мөһим.Праймерлар PCR көчәйтүнең үзенчәлеге һәм эффективлыгы белән бәйле, һәм түбәндәге принципларга таянып эшләнергә мөмкин:
- Праймер озынлыгы: 18-30bp.
- GC эчтәлеге: 40-60%.
- Tm кыйммәте: Праймер 5 кебек праймериз дизайн программалары, праймерның Tm кыйммәтен бирә ала.Агымдагы һәм агымдагы праймерларның Tm кыйммәтләре мөмкин кадәр якын булырга тиеш.Tm исәпләү формуласын да кулланырга мөмкин: Tm = 4 ° C (G + C) + 2 ° C (A + T).PCR эшләгәндә, 5 ° C примердан түбән температура, гадәттә, аннальинг температурасы итеп сайлана (анналь температураның тиешле артуы PCR реакциясенең үзенчәлеген арттырырга мөмкин).
- Праймерлар һәм PCR продуктлары:
- Дизайн праймериз PCR көчәйтү продуктының озынлыгы яхшырак 100-150bp.
- Шаблонның икенчел структур өлкәсендә дизайн праймериз мөмкин кадәр сакланырга тиеш.
- Агымдагы һәм аскы агымның 3 ′ очлары арасында 2 яки күбрәк тулыландыргыч нигезләр формалашудан сакланыгыз.
- Пример 3 ′ терминал базасы 3 өстәмә G яки C белән була алмый.
- Праймерларның үзләре тулыландыручы структураларга ия була алмыйлар, югыйсә PCR көчәйтүенә тәэсир итеп, чәч структурасы барлыкка киләчәк.
- ATCG праймер эзлеклелегендә мөмкин кадәр тигез таратылырга тиеш, һәм 3 ′ терминал базасы Т кебек сакланырга тиеш.
Кушымта1 ： С.ell DirectRT-qPCR Комплектt өстәмә пакет
1. Лизис чишелешен чакырыгыз
| Күзәнәк лизисы чишелеше | |||
| Комплект компонентлары (24 кое лизис системасы / кое) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 Т. | 500 Т. | ||
| PartлешМин | Буфер КЛ | 20 мл | 100 мл |
| Foregene Protease Plus II | 400 μл | 1 мл × 2 | |
| Буфер СТ | 1 мл × 2 | 10 мл | |
| PartлешII | ДНК Эразер | 400 μл | 1 мл × 2 |
| RT Mix | |
| Комплект компонентлары (20 μл реакция системасы) | DRT-01011-B1 |
| 200 Т. | |
| 5 × Туры Микс | 800 μл |
| RNase-ddH2O | 1,7 мл × 2 |
| qPCR Микс | ||
| Комплект компонентлары (20 μл реакция системасы) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
| 200 Т. | 1000 Т. | |
| 2 × Туры qPCR Микс-Такман | 1 мл × 2 | 1,7 мл × 6 |
| 20 × ROX сылтама буяу | 40 μл | 200 μл |
| RNase-ddH2O | 1,7 мл | 10 мл |
Күрсәтмә кулланмалар:
