Хайваннарның гомуми РНК изоляциясе комплекты РНКны чыгару һәм хайван тукымалары һәм күзәнәк өчен чистарту комплектлары
Комплектлар тасвирламасы
50 әзерлек, 200 әзерлек
Бу комплектәйләнү баганасы һәм формулабезнең компания тарафыннан эшләнгән, югары чисталык һәм югары сыйфатлы гомуми РНКны төрле хайван тукымаларыннан югары эффективлык белән чыгара ала. Бу эффектив ДНК чистарту баганасы белән тәэмин итә, ул геном ДНКны супернатант һәм тукымалар лизатыннан җиңел аера ала, гади һәм вакытны саклый;РНК гына багана РНКны эффектив бәйли ала һәм бер үк вакытта уникаль формула белән эшкәртелә ала.
Бөтен система RNase-Free, чыгарылган РНК бозылмасын өчен;Буфер RW1, буфер RW2 буфер юу системасы, алынган РНК белок, ДНК, ион һәм органик кушылмалар пычрануыннан азат.
Комплект компонентлары
Хайваннарның гомуми РНК изоляциясе комплекты | ||
Комплект компонентлары | RE-03011 | RE-03014 |
50 Т. | 200 Т. | |
Буфер RL1 * | 25мл | 100мл |
Буфер RL2 | 15мл | 60мл |
Буфер RW1 * | 25мл | 100мл |
Буфер RW2 | 24мл | 96мл |
RNase-ddH2O | 10мл | 40мл |
РНК баганасы | 50 | 200 |
ДНК чистарту баганасы | 50 | 200 |
Инструкция кулланмасы | 1 кисәк | 1 кисәк |
Продукция турында мәгълүмат
Формат | Колонны әйләндерү | Чистарту компоненты | Алдан багана, реагент |
Агым | 1-24 үрнәк | Алдан әзерләнү вакыты | ~ 30 мин (24 үрнәк) |
Centентрифуга | Өстәл центрифугасы | Пиролизны аеру | Centентрифугааль аеру |
Ampleрнәк | Хайван тукымасы;күзәнәк | Samрнәкләр күләме | Кисем: 10-20 мг;Шакмак: (1-5) × 106 |
Элитация күләме | 50-200 μL | Максималь йөкләү күләме | 850 μЛ |
Featuresзенчәлекләр һәм өстенлекләр
R РНК деградациясе турында борчылырга кирәкми;бөтен система RNase-Free
D ДНК кулланган ДНКны чистарту баганасын эффектив рәвештә бетерегез
DN DNase кушмыйча ДНКны бетерегез
Room Гади-барлык операцияләр бүлмә температурасында тәмамлана
■ Тиз операция 30 минутта тәмамланырга мөмкин
Organic Куркынычсыз органик реагент кирәк түгел
■ purгары чисталык -OD260 / 280≈1.8-2.1
Комплект кушымтасы
Төрле яңа яки туңдырылган хайван тукымаларыннан яки культуралы күзәнәкләрдән гомуми РНКны чыгару һәм чистарту өчен яраклы.
Продукция параметрлары
■ Агымдагы кушымталар: беренче катлы CDNA синтезы, RT-PCR, молекуляр клонлау, Төньяк блок һ.б.
■ plesрнәкләр: хайван тукымалары, культуралы күзәнәкләр
■ Дозасы: тукымалар 10-20мг, күзәнәкләр (2-5) × 106
Pur Чистарту баганасының максималь ДНК бәйләү сыйфаты: 80 μг
■ Элитация күләме: 50-200 μл
Диаграмма
Хайваннарның гомуми РНК изоляциясе комплекты 20мг эшкәртелде
Яңа тычкан үрнәкләре, 5% чистартылган гомуми РНК 1% агар алыгыз
Гликогел электрофорезы
1: Флот 2: Бөер
3: бавыр 4: йөрәк
Саклау һәм саклану вакыты
Комплект 24 ай бүлмә температурасында (15-25 ℃) яки озаграк 2–8 can сакланырга мөмкин.Буфер RL1 4- mer меркаптоетанол кушылганнан соң 1 ай дәвамында сакланырга мөмкин (өстәмә).
Мәкаләләр китерелгән
1.IF: 18.808:Чжэн, С., inин, Ф., Луо, Р., һ.б.Rзәк композит дизайнын оптимизацияләү аша бавыр базасын редакцияләү өчен mRNA-Липидка охшаган Нанопартиклар.Адв.Функция.Матер.2021, 31, 2011068.doi: 10.1002 / adfm.202011068.
2.IF: 18.187:Ул X, Гонг В, Янг Дж һ.б.Терапевтик тамыр күзәнәкләрен әзерләгәндә күзәнәкләрнең үз-үзеннән апоптозы фосфатидилсерин чыгару аша иммуномодулятор эффектлар ясый.Сигнал трансдуктив максат.2021 14 июль; 6 (1): 270.doi: 10.1038 / s41392-021-00688-z.
3.IF: 17.97: Дай З, Лю Н, Ляо Дж, һ.б.N7-Метилгуаносин tRNA модификациясе онкогеник mRNA тәрҗемәсен көчәйтә һәм интерхепатик холангиокарцинома үсешенә ярдәм итә.Мол күзәнәк.2021 29 июль: S1097-2765 (21) 00555-4.doi: 10.1016 / j.molcel.2021.07.003.
4.IF: 9.225: Cao X, Shu Y, Chen Y, һ.б.Mettl14-Mediated m6A модификациясе Эндоплазмик Ретикулум Гомеостазын саклап, бавырның яңарышын җиңеләйтә.Маст Гастроэнтерол Гепатол.2021; 12 (2): 633-651.doi: 10.1016 / j.jcmgh.2021.04.001.
РНК изоляциясе комплектлары бүтән үрнәк чыганакларбар:
Күзәнәк, үсемлек, вирус, кан һ.б.
РНК чыгарылмый яки РНК уңышлары аз
Бетерү эффективлыгына еш йогынты ясаучы төрле факторлар бар, мәсәлән: тукымалар үрнәге РНК эчтәлеге, эш ысулы, элитация күләме һ.б.
1. Боз мунчасы яки криогеник (4 ° C) центрифугация операция вакытында башкарылды.
Реклама: Бүлмә температурасында (15-25 ° C) эшләгез, түбән температурада боз мунчасын һәм центрифуга куймагыз.
2. Начар үрнәкне саклау яки артык үрнәк саклау вакыты.
Реклама: -80 ° C үрнәкләрен саклагыз яки сыек азотта туңдырыгыз һәм кат-кат туңдырудан сакланыгыз.РНК алу өчен яңа тукыманы яки культуралы күзәнәкләрне кулланырга тырышыгыз.
3. Лизис үрнәге җитәрлек түгел.
Тәкъдим итү: Гомогенизация тукымасы булганда, тукыманың җитәрлек гомогенизацияләнүен һәм тукымалар күзәнәкләренең РНК чыгарылышын аңлату өчен җитәрлек бүленүен тәэмин итегез.
4. Элуент дөрес кушылмый.
Реклама: RNase-ddH булуын раслагыз2O чистарту баганасы мембранасы уртасына тамчы тамчы өстәлә.
5. Буфер RL2 яки Буфер RW2 өчен абсолют этанолның дөрес күләме кушылмады.
Реклама: Инструкцияне үтәгез, буфер RL2 һәм Буфер RW2-ка дөрес күләмле абсолют этанол кушыгыз һәм комплектны кулланганчы яхшылап кушыгыз.
6. Кисем үрнәге дозасы урынлы түгел.
Реклама: 10-20 мг тукыманы яки (1-5) × 10 кулланыгыз6500 μл буфер RL1 күзәнәкләре, чөнки тукымаларны артык куллану РНК чыгаруны киметергә мөмкин.
7. Дөрес булмаган элитация күләме яки тулы булмаган элитация.
Реклама: Чистарту баганасының элитация күләме 50-200 μл;элитация эффекты канәгатьләнерлек булмаса, җылытылган RNase-Free ddH кушылганнан соң бүлмә температурасын урнаштыру вакытын озайтырга киңәш ителә.2О, мәсәлән, 5-10 минут.
8. Чистарту баганасында буфер RW2 юылганнан соң этанол калдыклары бар.
Реклама: Буфер RW2 юылганнан соң этанол калдыклары булса, 1 минутка буш торба центрифугациясе булса, буш трубаны центрифугация вакыты 2 минутка арттырылырга мөмкин, яисә чистарту баганасы бүлмә этанолын 5 минутка урнаштырырга мөмкин.
Чистартылган РНК бозыла
Чистартылган РНКның сыйфаты үрнәкне саклау, RNase пычрануы, манипуляция һ.б. кебек факторлар белән бәйле.
1. Кисем үрнәкләре вакытында сакланмый.
Реклама: Әгәр тукымалар үрнәкләре яки күзәнәкләр җыелганнан соң вакытында кулланылмаса, шунда ук крипопрезерв -80 ° C яки сыек азот.РНКны чыгару өчен, мөмкин булган вакытта яңа алынган тукыманы яки күзәнәк үрнәген кулланыгыз.
2. Тукымалар үрнәкләрен кат-кат туңдыру.
Реклама: тукымалар үрнәкләрен саклаганда, аларны саклау өчен кечкенә кисәкләргә бүлеп, үрнәкне кат-кат туңдыру һәм РНК деградациясен булдырмас өчен кулланганда иң яхшысы.
3. Операция вакытында RNase кертелә яки бер тапкыр кулланыла торган перчаткалар, битлекләр һ.б.
Реклама: РНК алу экспериментлары иң яхшы РНК манипуляция бүлмәләрендә башкарыла һәм эксперимент алдыннан таблицаны чистарталар.
Эксперимент вакытында бер тапкыр кулланыла торган перчаткалар һәм битлекләр киегез, RNase кертү аркасында килеп чыккан РНК деградациясен киметү өчен.
4. Реагентлар куллану вакытында RNase белән пычранган.
Реклама: Бәйләнешле экспериментлар өчен яңа хайваннарның гомуми RNA изоляциясе комплекты белән алыштырыгыз.
5. РНК манипуляциясендә кулланылган центрифуга трубалары, киңәшләр һ.б. RNase белән пычранган.
Реклама: РНК чыгаруда кулланылган центрифуга трубалары, киңәшләр, пипеталар һ.б. барысы да RNase-Free булуын раслагыз.
Чистартылган РНК түбән агымдагы экспериментларга тәэсир итә
Чистарту баганасы белән чистартылган РНК, тоз ионнары булса, протеинның күләме бик зур булса, агымдагы экспериментка тәэсир итәчәк, мәсәлән: кире транскрипция, Төньяк Блот һ.б.
1. РНКның тозлы ион калдыклары бар.
Реклама: Буфер RW2-ка дөрес этанол кушылганын раслагыз һәм операция өчен күрсәтелгән центрифугаль тизлектә 2 чистарту баганасын юыгыз.тоз ионы калдыклары булса, чистарту колонкасын буфер RW2 бүлмә температурасында 5 минутка калдырыгыз һәм тоз пычрануны максимумлаштыру өчен центрифугация эшләгез.
2. РНКда этанол калдыклары.
Реклама: Буфер RW2 юылганнан соң, буш торбаны центрифугация операциясен башкару өчен күрсәтелгән центрифугация тизлегендә эшләгез, этанол калдыклары булса, буш торбаны центрифугацияләү вакытын 2 минутка арттырыгыз, яки этанол калдыкларын максимумлаштыру өчен буш температурада 5 минутка калдырыгыз.