Күзәнәкнең гомуми РНК изоляциясе комплекты РНК изоляциясен чистарту комплектлары
Комплект тасвирламасы:
11 минут эчендә төрле культуралы күзәнәкләрдән югары чистартылган һәм югары сыйфатлы гомуми РНК алырга мөмкин.
RNase-Free
Бүлмә температурасында эшли (15-25 ℃)
ДНК чистарту баганасы белән
Rгары РНК уңышы
Тиз: чыгаруны 11 минутта тәмамлагыз
Куркынычсызлык: юк Органик химик
Тасвирлау
Бу комплект Foregene тарафыннан эшләнгән спин баганасын һәм формуласын куллана, ул 96, 24, 12, һәм 6 кое тәлинкәләрдә культуралы күзәнәкләрдән югары чисталык һәм югары сыйфатлы гомуми РНКны эффектив рәвештә чыгара ала.
Комплект эффектив ДНК-чистарту баганасын тәэмин итә, ул супернатант һәм күзәнәк лизатын җиңел аера ала, геном ДНКны бәйли һәм бетерә ала.Операция гади һәм вакытны экономияли.
Tул РНК-багана РНКны уникаль формула белән эффектив бәйли ала.Күп санлы үрнәкләр берьюлы эшкәртелергә мөмкин.
Комплект компонентлары
| Комплект композициясе | RE-03111 | RE-03114 |
| 50 Т. | 200 Т. | |
| Буфер cRL1 * | 25 мл | 100 мл |
| Буфер cRL2 | 15 мл | 60 мл |
| Буфер RW1 * | 25 мл | 100 мл |
| Буфер RW2 | 24 мл | 96 мл |
| RNase-ddH2O | 10 мл | 40 мл |
| РНК-багана | 50 | 200 |
| ДНК чистарту баганасы | 50 | 200 |
| Инструкция | 1 | 1 |
* Зинһар, перчаткалар киегез һәм операция вакытында саклагыч чаралар күрегез, чөнки Buffer cRL1 һәм Buffer RW1 ачуландыручы хаотроп тозлары бар.
Featuresзенчәлекләр һәм өстенлекләр
■ Бөтен процесс бүлмә температурасында (15-25 ℃), боз мунчасы һәм түбән температурада центрифугациясез эшләнә.
Kit Бөтен комплект RNase-Free, РНК деградациясе турында борчыласы юк.
■ ДНК-чистарту баганасы махсус ДНКны бәйләмичә, геном ДНК пычрануын бетерә алырлык итеп ДНКны бәйли.
■ Rгары РНК уңышы: РНК гына багана һәм уникаль формула РНКны эффектив чистарта ала.
■ Тиз тизлек: эшләү җиңел һәм 11 минутта тәмамланырга мөмкин.
■ Куркынычсызлык: Органик реагент кирәк түгел.
■ qualityгары сыйфат: Чистартылган РНК югары чисталыкта, протеиннан һәм башка пычраклардан азат, һәм алдагы төрле экспериментларга каршы тора ала.
Комплект кушымтасы
Ул 96, 24, 12, һәм 6 кое тәлинкәләрдә культуралы күзәнәкләрдән гомуми РНКны чыгару һәм чистарту өчен яраклы.
Эш агымы
Диаграмма
Күзәнәкнең гомуми RNA изоляциясе комплектының агароза гел батарея схемасы югарыдагы төрле күзәнәкләрне эшкәртте, 20μл күләмен чистарту, 2μл чистартылган гомуми РНКны 1% алыгыз.
Саклау һәм саклану вакыты
Комплект 12 ай бүлмә температурасында (15-25 ℃) яки 2–8 longer озаграк (24 ай) сакланырга мөмкин.
CRL1 буферы 2-гидрокси-1-этанетиол кушылганнан соң 1 ай дәвамында 4 at сакланырга мөмкин.
РНК чыгарылмый яки РНК уңышлары аз
Бетерү эффективлыгына еш йогынты ясаучы төрле факторлар бар, мәсәлән: тукымалар үрнәге РНК эчтәлеге, эш ысулы, элитация күләме һ.б.
1. Боз мунчасы яки криогеник (4 ° C) центрифугация операция вакытында башкарылды.
Реклама: Бүлмә температурасында (15-25 ° C) эшләгез, түбән температурада боз мунчасын һәм центрифуга куймагыз.
2. Начар үрнәкне саклау яки артык үрнәк саклау вакыты.
Реклама: -80 ° C үрнәкләрен саклагыз яки сыек азотта туңдырыгыз һәм кат-кат туңдырудан сакланыгыз.РНК алу өчен яңа тукыманы яки культуралы күзәнәкләрне кулланырга тырышыгыз.
3. Лизис үрнәге җитәрлек түгел.
Тәкъдим итү: Гомогенизация тукымасы булганда, тукыманың җитәрлек гомогенизацияләнүен һәм тукымалар күзәнәкләренең РНК чыгарылышын аңлату өчен җитәрлек бүленүен тәэмин итегез.
4. Элуент дөрес кушылмый.
Реклама: RNase-ddH булуын раслагыз2O чистарту баганасы мембранасы уртасына тамчы тамчы өстәлә.
5. Буфер RL2 яки Буфер RW2 өчен абсолют этанолның дөрес күләме кушылмады.
Реклама: Инструкцияне үтәгез, буфер RL2 һәм Буфер RW2-ка дөрес күләмле абсолют этанол кушыгыз һәм комплектны кулланганчы яхшылап кушыгыз.
6. Кисем үрнәге дозасы урынлы түгел.
Реклама: 10-20 мг тукыманы яки (1-5) × 10 кулланыгыз6500 μл буфер RL1 күзәнәкләре, чөнки тукымаларны артык куллану РНК чыгаруны киметергә мөмкин.
7. Дөрес булмаган элитация күләме яки тулы булмаган элитация.
Реклама: Чистарту баганасының элитация күләме 50-200 μл;элитация эффекты канәгатьләнерлек булмаса, җылытылган RNase-Free ddH кушылганнан соң бүлмә температурасын урнаштыру вакытын озайтырга киңәш ителә.2О, мәсәлән, 5-10 минут.
8. Чистарту баганасында буфер RW2 юылганнан соң этанол калдыклары бар.
Реклама: Буфер RW2 юылганнан соң этанол калдыклары булса, 1 минутка буш торба центрифугациясе булса, буш трубаны центрифугация вакыты 2 минутка арттырылырга мөмкин, яисә чистарту баганасы бүлмә этанолын 5 минутка урнаштырырга мөмкин.
Чистартылган РНК бозыла
Чистартылган РНКның сыйфаты үрнәкне саклау, RNase пычрануы, манипуляция һ.б. кебек факторлар белән бәйле.
1. Кисем үрнәкләре вакытында сакланмый.
Реклама: Әгәр тукымалар үрнәкләре яки күзәнәкләр җыелганнан соң вакытында кулланылмаса, шунда ук крипопрезерв -80 ° C яки сыек азот.РНКны чыгару өчен, мөмкин булган вакытта яңа алынган тукыманы яки күзәнәк үрнәген кулланыгыз.
2. Тукымалар үрнәкләрен кат-кат туңдыру.
Реклама: тукымалар үрнәкләрен саклаганда, аларны саклау өчен кечкенә кисәкләргә бүлеп, үрнәкне кат-кат туңдыру һәм РНК деградациясен булдырмас өчен кулланганда иң яхшысы.
3. Операция вакытында RNase кертелә яки бер тапкыр кулланыла торган перчаткалар, битлекләр һ.б.
Реклама: РНК алу экспериментлары иң яхшы РНК манипуляция бүлмәләрендә башкарыла һәм эксперимент алдыннан таблицаны чистарталар.
Эксперимент вакытында бер тапкыр кулланыла торган перчаткалар һәм битлекләр киегез, RNase кертү аркасында килеп чыккан РНК деградациясен киметү өчен.
4. Реагентлар куллану вакытында RNase белән пычранган.
Реклама: Бәйләнешле экспериментлар өчен яңа хайваннарның гомуми RNA изоляциясе комплекты белән алыштырыгыз.
5. РНК манипуляциясендә кулланылган центрифуга трубалары, киңәшләр һ.б. RNase белән пычранган.
Реклама: РНК чыгаруда кулланылган центрифуга трубалары, киңәшләр, пипеталар һ.б. барысы да RNase-Free булуын раслагыз.
Чистартылган РНК түбән агымдагы экспериментларга тәэсир итә
Чистарту баганасы белән чистартылган РНК, тоз ионнары булса, протеинның күләме бик зур булса, агымдагы экспериментка тәэсир итәчәк, мәсәлән: кире транскрипция, Төньяк Блот һ.б.
1. РНКның тозлы ион калдыклары бар.
Реклама: Буфер RW2-ка дөрес этанол кушылганын раслагыз һәм операция өчен күрсәтелгән центрифугаль тизлектә 2 чистарту баганасын юыгыз.тоз ионы калдыклары булса, чистарту колонкасын буфер RW2 бүлмә температурасында 5 минутка калдырыгыз һәм тоз пычрануны максимумлаштыру өчен центрифугация эшләгез.
2. РНКда этанол калдыклары.
Реклама: RW2 буферын юганнан соң, буш трубаны центрифугация операциясен башкару өчен күрсәтелгән центрифугация тизлегендә эшләгез, буш торба центрифугация операциясе вакытын 2 минутка арттырыгыз, яисә этанол калдыклары булса, яки бүлмә температурасында 5 м калдырыгыз.
