Көчәйтү сигналлары юк

1.Кактагы Так ДНК Полимеразы дөрес саклану яки комплектның бетүе аркасында активлыгын югалта.
Реклама: комплектның саклау шартларын раслагыз;PCR системасына тиешле күләмдә Так ДНК Полимеразын өстәгез яки бәйләнешле экспериментлар өчен яңа Real Time PCR комплектын сатып алыгыз.

2. ДНК шаблонында Так ДНК Полимеразының ингибиторы бик күп.
Тәкъдим: Шаблонны кабатлагыз яки кулланылган шаблон күләмен киметегез.

3.Мг2 + концентрациясе яраксыз.
Реклама: Без күрсәткән 2 × Real PCR Mix концентрациясе 3,5мм.Ләкин, кайбер махсус праймериз һәм шаблоннар өчен Mg2 + концентрациясе югарырак булырга мөмкин.Шуңа күрә, сез Mg2 + концентрациясен оптимальләштерү өчен турыдан-туры MgCl2 өсти аласыз.Оптимизация өчен һәрвакыт Mg2 + 0,5mM арттырырга киңәш ителә.

4. PCR көчәйтү шартлары яраксыз, һәм пример эзлеклелеге яки концентрациясе дөрес түгел.
Тәкъдим: праймер эзлеклелегенең дөреслеген раслагыз һәм праймер бозылмады;көчәйтү сигналы яхшы булмаса, анналь температураны төшерергә һәм праймер концентрациясен тиешенчә көйләргә тырышыгыз.

5. Шаблон күләме бик аз яки артык.
Реклама: Шаблон сызыклы градиент эретүне башкарыгыз, һәм Real Time PCR эксперименты өчен иң яхшы PCR эффекты белән шаблон концентрациясен сайлагыз.

NTC артык югары флюоресенция кыйммәтенә ия

1. Эш вакытында килеп чыккан реагент пычрану.
Реклама: Real Time PCR экспериментлары өчен яңа реагентлар белән алыштырыгыз.

2. Пычрату PCR реакция системасын әзерләгәндә булды.
Реклама: Эш вакытында кирәкле саклагыч чаралар күрегез, мәсәлән: латекс перчаткалар киеп, фильтр белән пипетка очын куллану һ.б.

3.Паймерлар деградацияләнә, һәм праймерларның деградациясе махсус булмаган көчәйтүгә китерәчәк.
Тәкъдим: Праймерларның бозылганын ачыклау өчен SDS-PAGE электрофорезын кулланыгыз, һәм аларны Real Time PCR экспериментлары өчен яңа праймерлар белән алыштырыгыз.

Праймер димер яки специаль булмаган көчәйтү

1.Мг2 + концентрациясе яраксыз.
Реклама: 2 × Real PCR EasyTM Миксның Mg2 + концентрациясе - 3,5 мм.Ләкин, кайбер махсус праймериз һәм шаблоннар өчен Mg2 + концентрациясе югарырак булырга мөмкин.Шуңа күрә, сез Mg2 + концентрациясен оптимальләштерү өчен турыдан-туры MgCl2 өсти аласыз.Оптимизация өчен һәрвакыт Mg2 + 0,5mM арттырырга киңәш ителә.

2. PCR аннальинг температурасы бик түбән.
Тәкъдим: PCR аннальинг температурасын һәрвакыт 1 ℃ яки 2 Inc арттырыгыз.

3. PCR продукты бик озын.
Реклама: Real Time PCR продуктының озынлыгы 100-150bp арасында булырга тиеш, 500bp-тан артык түгел.

4.Паймерлар деградацияләнә, һәм праймерларның деградациясе махсус көчәйтү күренешенә китерәчәк.
Тәкъдим: Праймерларның бозылганын ачыклау өчен SDS-PAGE электрофорезын кулланыгыз, һәм аларны Real Time PCR экспериментлары өчен яңа праймерлар белән алыштырыгыз.

5.ПКР системасы дөрес түгел, яки система бик кечкенә.
Тәкъдим: PCR реакция системасы бик кечкенә, ачыклау төгәллегенең кимүенә китерәчәк.Real Time PCR экспериментын яңадан эшләтеп җибәрү өчен санлы PCR инструменты тәкъдим иткән реакция системасын куллану иң яхшысы.

Сан кыйммәтләренең начар кабатлануы

1. Инструмент эшләми.
Тәкъдим: Коралның һәр PCR тишеге арасында хаталар булырга мөмкин, нәтиҗәдә температура белән идарә итү яки ачыклау вакытында начар репродуктивлык.Зинһар, тиешле корал күрсәтмәләре буенча тикшерегез.

2. ampleрнәк чисталык яхшы түгел.
Реклама: Начар үрнәкләр экспериментның начар репродуктивлыгына китерәчәк, ул шаблон һәм праймерларның чисталыгын үз эченә ала.Шаблонны яңарту иң яхшысы, һәм праймериз SDS-PAGE белән иң яхшы чистартылган.

3. PCR системасын әзерләү һәм саклау вакыты бик озын.
Тәкъдим: PCR эксперименты өчен Real Time PCR системасын әзерләгәннән соң кулланыгыз, һәм аны бик озак калдырмагыз.

4. PCR көчәйтү шартлары яраксыз, һәм пример эзлеклелеге яки концентрациясе дөрес түгел.
Тәкъдим: праймер эзлеклелегенең дөреслеген раслагыз һәм праймер бозылмады;көчәйтү сигналы яхшы булмаса, анналь температураны төшерергә һәм праймер концентрациясен тиешенчә көйләргә тырышыгыз.

5.ПКР системасы дөрес түгел, яки система бик кечкенә.
Тәкъдим: PCR реакция системасы бик кечкенә, ачыклау төгәллегенең кимүенә китерәчәк.Real Time PCR экспериментын яңадан эшләтеп җибәрү өчен санлы PCR инструменты тәкъдим иткән реакция системасын куллану иң яхшысы.