Полисахаридларга һәм полифенолларга бай үсемлек өчен тулы РНК изоляциясе комплекты плюс гомуми РНК Пурифайтон комплекты.
Комплект тасвирламасы:
Мәче.Р.-05021 / 05022/05024
Гомуми үсемлек үрнәкләреннән югары полисахарид һәм полифенол компонентларын чистарту өчен.
Полисахаридлар һәм полифеноллар булган үсемлек үрнәкләреннән югары сыйфатлы гомуми РНКны тиз чыгарыгыз.
ДНК-чистарту баганасын кулланып RNase-Free
Гади - барлык операцияләр бүлмә температурасында тәмамланган
Тиз - операция 30 минутта тәмамланырга мөмкин
Куркынычсыз - органик реагент кулланылмый 
Характеристикалар
50 әзерлек, 200 әзерлек
Комплект Foregene тарафыннан эшләнгән спин баганасын һәм формуласын куллана, алар югары полисахаридлар яки полифеноллар булган төрле үсемлек тукымаларыннан югары чисталык һәм югары сыйфатлы гомуми РНКны эффектив рәвештә чыгара ала.Ул ДНК-чистарту баганасы белән тәэмин итә, ул геномик ДНКны супернант һәм тукымалар лизатыннан җиңел чыгара ала.РНК гына баганасы РНКны эффектив бәйли ала.Комплект бер үк вакытта күп санлы үрнәкләрне эшкәртә ала.
Бөтен системада RNase юк, шуңа күрә чистартылган РНК бозылмас.Буфер PRW1 һәм буфер PRW2 алынган РНКның протеин, ДНК, ион һәм органик кушылмалар белән пычранмавын тәэмин итә ала.
Комплект компонентлары
| Буфер PSL1, Буфер PS, Буфер PSL2 |
| Буфер PRW1, буфер PRW2 |
| RNase-ddH2О, ДНК чистарту баганасы |
| РНК-багана |
Featuresзенчәлекләр һәм өстенлекләр
Room Бүлмә температурасында (15-25 ℃) бөтен процесс дәвамында, боз мунчасы һәм түбән температурада центрифугациясез.
RN тулы комплект RNase-Free, РНК деградациясе турында борчыласы юк.
R РНКны полисахаридлар һәм полифенолларның үсемлек үрнәкләреннән чистарту өчен аеруча яраклы.
■ ДНК-чистарту баганасы махсус ДНК белән бәйләнгән, комплект DNase кушмыйча геном ДНК пычрануын бетерә ала.
■ Rгары РНК уңышы: РНК гына багана һәм уникаль формула РНКны эффектив чистарта ала.
■ Тиз тизлек: эшләү җиңел һәм 30 минут эчендә тәмамланырга мөмкин.
■ Куркынычсызлык: органик реагент кирәк түгел.
■ qualityгары сыйфат: Чистартылган РНК фрагментлары югары чисталыкта, протеиннар һәм башка пычракларсыз, һәм төрле агымдагы эксперименталь кушымталарны очратырга мөмкин.
Продукция параметрлары
■ Агымдагы кушымталар: беренче катлы CDNA синтезы, RT-PCR, молекуляр клонлау, Төньяк блок һ.б.
■ ampleрнәк: полисахаридларның һәм полифенолларның яңа яки туңдырылган үсемлек тукымалары
■ Дозасы: 50мг үсемлек тукымасы
Pur Чистарту баганасының максималь РНК бәйләү сыйфаты: 80 μг
■ Элитация күләме: 50-200 μл
Комплект кушымтасы
Бу югары полисахарид һәм полифенол эчтәлеге булган яңа яки туңдырылган үсемлек тукымаларыннан (аеруча яңа үсемлек яфрагы тукымаларыннан) гомуми РНКны чыгару һәм чистарту өчен яраклы.
Эш агымы
Диаграмма
Totalсемлекнең гомуми РНК изоляциясе комплекты 50мг полисахаридларның һәм полифенолларның яңа яфракларын эшкәртте, һәм 5% чистартылган РНК электрофорез белән сынады.
1: Банан
2: Гинкго
3: мамык
4: Анар
Саклау һәм саклану вакыты
Бу комплект 24 ай эчендә коры шартларда бүлмә температурасында сакланырга мөмкин (15-25 ℃);озаграк сакланырга кирәк булса, аны 2–8 in сакларга мөмкин.
PSL1 буферы--меркаптоетанол кушылганнан соң 1 айга 4 at урнаштырылырга мөмкин (аны бер үк вакытта эксперимент вакытында өстәргә киңәш ителә).
Колонка ялганды
Колонка бәйләнгәннән соң, РНК җитештерү күләме кими, хәтта РНКны чистарту мөмкин түгел, һәм алынган РНК массасы аз.
Гомуми сәбәп анализы:
1. breakрнәк тәнәфесләр җентекле түгел.
Ampleрнәк өзелү ДНК-Чистарту Колумнасын тулысынча блокламый, шул ук вакытта РНК уңышына һәм сыйфатына тәэсир итә.Samрнәкләрне сындыргач, җитәрлек сыек азотта тиз тарту эшләрен тәкъдим итәбез, күзәнәк стенасын, күзәнәк мембранасын һәм башка тукымаларны җимерергә тырышыгыз.Полиол полисахаридларның үсемлек үрнәкләре өчен, без үсемлекнең гомуми RNA ISOLATION KIT PLUS кулланырга киңәш итәбез.
2. Аерылган үрнәк супернатантны ДНК-чистарту баганасы белән сораганда, күзәнәкнең фрагментланган явым-төшеме сулыш алырга мөмкин.
Алынган күзәнәкнең фрагмент чокырлары РНК-БАРЫ баганага китерәчәк, ул РНК adsorption операциясе башкарылганда блокланачак (6 адым кара).Күзәнәк калдыкларын сорамас өчен, без бу супернантны сораган вакытта сак булырга киңәш итәбез.
3. Башлангыч сумма үрнәге артык.
Артык үрнәк куллану Буфер PSL1 тарафыннан тулы булмаган үрнәк фрагментлашуга яки тулы булмаган күзәнәк лизисына китерәчәк, нәтиҗәдә чистарту вакытында чистарту баганасы блоклануга китерәчәк.Totalсемлекнең гомуми РНК изоляциясе комплекты Eachәрбер чистартылган эш үрнәге 50 мг.Полиол полисахаридларның үсемлек үрнәкләре өчен, без үсемлекнең гомуми RNA изоляциясе комплектын кулланырга тәкъдим итәбез.
4. centентрифуга температурасы бик түбән.
Бөтен РНК изоляциясе һәм чистарту процессы бүлмә температурасында (20-25) үткәрелә°В), үрнәк тукымалар сыек азот белән өзелгәннән кала. Кайбер криоген центрифугларның температурасы 20 дән түбән;℃, ДНК-чистарту баганасы һәм / яки РНК-багана блокына китерергә мөмкин.Бу очракта центрифуга температурасын 20-25 итеп куегыз℃, һәмлизис катнашмасы һәм / яки этанол кушылган супернатант 37кә кадәр җылытылганына инаныгыз°C.
РНК алынган яки РНК җитештерүчәнлеге түбән түгел
Гадәттә торгызу эффективлыгына тәэсир итүче күп факторлар бар, мәсәлән: РНК үрнәге, эш ысулы, элитация күләме һ.б.
Гомуми сәбәпләрне түбәндәгечә анализлау:
1. Операция вакытында боз мунчасы яки түбән температурада (4 ° C) центрифугация ясалды.
Тәкъдим: Бүлмә температурасында эшләгез (15-25°В) бөтен процесста боз мунчасын һәм түбән температурада центрифугация эшләмәгез.
2. РНК үрнәкне дөрес сакламау яки үрнәкне озак саклау аркасында бозылды.
Реклама: Яңа җыелган үрнәкләр сыек азотта тиз туңдырылырга тиеш, аннары -80 ° C озак сакланырга, үрнәкләрне кат-кат туңдырудан һәм эретүдән сакланырга;яки үрнәкләрне шунда ук РНК стабилизаторы RNAlater эремәсенә (хайван үрнәкләре) сеңдерегез.
3. ampleрнәк булмаган фрагментлашу һәм лизис чистарту баганасының блокына китерә.
Тәкъдим: тукыманы тартканда, тукыманың җитәрлек җир булуына инаныгыз, һәм аны тиз әзерләнгән Буфер PSL1 күчерегез (β-MEның дөрес өлеше кушылганын раслагыз, процедураның 1 адымын карагыз).
4.Элуент дөрес булмаган өстәлде.
Тәкъдим: RNase-Free ddH2O чистарту баганасы мембранасы уртасына төшкәненә инаныгыз.
5.Бафер PSL2 яки PRW2 буферына абсолют этанолның дөрес күләме кушылмады.
Тәкъдим: Зинһар, күрсәтмәләрне үтәгез, буфер PSL2 һәм Буфер PRW2га абсолют этанол күләмен кушыгыз һәм комплект кулланылганчы яхшылап кушыгыз.
6. Тукымалар үрнәге күләме урынсыз.
Тәкъдим: 500 μл Буфер PSL1 өчен 50 мг тукыманы кулланыгыз.Артык тукыманы куллану алынган РНК күләмен киметәчәк һәм барлыкка килгән РНКның чисталыгы да кимиячәк.Беренче үрнәк дозасы РНК чыгару операциясенә 50 мг-дан артмаска киңәш итәбез.
7. Дөрес булмаган элитация күләме яки тулы булмаган элитация.
Тәкъдим: чистарту баганасының зур күләме 50-200 μл;элитация эффекты канәгатьләнерлек булмаса, 5-10мин кебек җылытылган RNase-Free ddH2O кушылганнан соң бүлмә температурасында вакытны озайтырга киңәш ителә.
8. Чистарту баганасында BufferPRW2 белән юылганнан соң этанол калдыклары бар.
Тәкъдим: Әгәр буш труба 1 минутка центрифугацияләнсә һәм буфер PRW2 юылганнан соң этанол калса, сез буш торбаны центрифугация вакытын 2 минутка арттыра аласыз, яки калдык этанолын тулысынча бетерү өчен чистарту баганасын бүлмә температурасында 5 минутка урнаштыра аласыз.
9. Комплект дөрес кулланылмады.
Тәкъдим: Полифенолик полисахаридларның үсемлек үрнәкләре өчен, гомуми РНК изоляциясе комплекты кебек гомуми комплектларны куллану идеаль РНК үрнәкләрен ала алмый.Сезгә полифенолик полисахарид үсемлек үрнәкләре өчен махсус эшләнгән Завод Тоталь RNA IsolationKit Plus кулланырга киңәш итәбез.Полифенол һәм полисахарид үсемлек үрнәкләреннән РНК алу өчен махсус эшләнгән комплект.
OD260 / OD280 бәясе түбән
DdH2O белән RNA элитациясе һәм спектропотометр уку өчен кулланыла, түбән OD260 / OD280 кыйммәтләренә китерә.OD260 / OD280 кыйммәтләрен алу өчен 10 мм Tris-HCl, pH 7.5 (RNase-Free ddH2O түгел) кулланырга киңәш итәбез, 19 нчы биттәге "РНК концентрациясе һәм чистарту бәяләре" не карагыз.
Чистартылган РНК бозыла
Чистартылган РНКның сыйфаты үрнәк саклау, RNase пычрануы, манипуляция кебек факторлар белән бәйле.
Гомуми сәбәпләргә анализ:
1.Карым үрнәкләре җыелганнан соң сакланмаган.
Реклама: Әгәр тукымалар үрнәкләре җыелганнан соң кулланылмаса, зинһар, аларны азот температурасында тиз азотта саклагыз яки сыек азотта тиз туңганнан соң озак вакыт саклау өчен -80 ° C ка күчерегез, яки үрнәкләрне шунда ук РНК стабилизаторы RNAlater эремәсенә (хайван үрнәкләре) чумыгыз.РНК алу өчен, яңа тупланган тукымалар үрнәкләрен кулланырга тырышыгыз.
2. Тукымалар үрнәкләрен кат-кат туңдыру һәм эретү.
Тәкъдим: тукымалар үрнәкләрен саклаганда, аларны саклау өчен кечкенә кисәкләргә бүлеп, үрнәкләрне кат-кат туңдыру һәм эретү аркасында РНК деградациясен булдырмас өчен куллану яхшырак.
3.RNase операция бүлмәсендә кертелә яки бер тапкыр кулланыла торган перчаткалар, битлекләр һ.б.
Тәкъдим: РНК чыгару экспериментлары иң яхшы РНК операцияләрендә үткәрелә, һәм лаборатория өстәлен эксперимент алдыннан чистартырга кирәк, һәм эксперимент вакытында бер тапкыр кулланыла торган перчаткалар һәм битлекләр RNase кертү аркасында килеп чыккан РНК деградациясен булдырмаска кирәк.
4. Реагент куллану вакытында RNase белән пычранган.
Тәкъдим: бәйләнешле экспериментлар өчен үсемлекнең гомуми РНК чыгару комплектларының яңа сериясен алыштырыгыз.
5.РНК манипуляциясе өчен кулланылган центрифуга трубалары һәм пипетта киңәшләре RNase белән пычранган.
Тәкъдим: РНК чыгаруда кулланылган центрифуга трубалары, пипетка киңәшләре, пипеталар һ.б. барысы да RNase-Free булуына инаныгыз.
Күрсәтмә кулланмалар:
Totalсемлекнең гомуми РНК изоляциясе комплекты күрсәтмәсе
