А260 / А230ның түбән катнашлыгы, гадәттә, 230nm максималь үзләштерү дулкын озынлыгы булган пычраклыклардан килеп чыга.Бу пычраклыкларга нәрсә керә икәнен карыйк:

• Гомуми пычраткыч матдәләр	Абсорбция дулкын озынлыгы	Нисбәт эффекты
  Протеин	~ 230нм һәм 280нм	Бер үк вакытта А киметү260/A 280һәм А.260/A 280нисбәтләре
  Гуанидин тозы	220-240 нм	А киметү260/A 280нисбәте
  Фенол	~ 270нм	-
  Тризол	~ 230нм һәм 270нм	А киметү260/A 280нисбәте
  EDTA	~ 230нм	А киметү260/A 280нисбәте
  Этанол	230-240 нм	А киметү260/A 280нисбәте

 
 
 
Абсорбция дулкын озынлыгы һәм гомуми пычраткыч матдәләрнең контраст бәясе

Pротеин пычрануы
Белгечләр пычрануы нуклеин кислотасын чыгару процессында иң таралган пычрану дип саналырга мөмкин.Протеин өске су фазасы белән аскы арасында барорганикфаза.Пычрату бер үк вакытта A260 / A280 һәм A260 / A230 нисбәтен киметәчәк, һәм A260 / A230 нисбәте A260 / A280 нисбәтенә караганда ачыкрак үзгәрәчәк.
Киләсе вакыттакире транскрипцияor qPCR реакцияләре, протеин калдыклары фермент функциясенә комачаулый яки комачаулый ала.Протеин пычрануыннан саклануның иң яхшы ысулы - супернатантка омтылганда "күп түгел, ә аз тапкыр" принцибын истә тоту.

2. Гуанидиний пычрануы
гидрохлорид (GuHCl) һәм гуанидин тиокянат (GTC) протеиннарны денатурацияләү эффектына ия, алар нуклеин кислотасын чыгару процессында күзәнәк мембраналарын тиз юк итә ала, протеин денатурациясенә һәм явым-төшемгә китерә.GuHCl һәм GTC үзләштерү дулкын озынлыгы 220-240 нм арасында, һәмкалдыклы гуанидиний тозы A260 / A230 нисбәтен киметәчәк.Гуанидиний тозы катнашуны киметәчәк,Агымдагы экспериментларга йогынтысы бик аз.

3. Тризол пычрануы
Тризолның төп компоненты - фенол.Фенолның төп функциясе - күзәнәкләрне лизлау һәм күзәнәкләрдә протеиннар һәм нуклеин кислотасы матдәләре чыгару.Фенол протеиннарны эффектив аера алса да, ул RNase эшчәнлеген тулысынча тыя алмый.Шуңа күрә, эндоген һәм экзоген RNaseны тыю өчен TRIzolга 8-гидроксикинолин, гуанидин изотиокянат, merc-меркаптоетанол һ.б. кушыла.
Кәрәзле РНКны чыгарганда, Тризол күзәнәкләрне тиз арада ябыштыра һәм күзәнәкләрдән чыгарылган нуклеазны тыя ала, һәм Trizol калдыклары A260 / A230 нисбәтен сизелерлек киметәчәк.
Эшкәртү ысулы: центрифуга ясаганда, шуны әйтергә кирәк: Тризолдагы фенол 4 ° һәм бүлмә температурасы шартларында су фазасында җиңел эри.

4. Этанол калдыклары
Соңгы процесста Этанол ДНКны яудыру өчен кулланыла, ДНК белән бәйләнгән тоз ионнарын эретә.Иң югары үзләштерү дулкын озынлыгысеңдерүнең иң югары ноктасыэтанол шулай ук ​​230-240 нм, бушулай ук ​​A260 / A230 нисбәтен киметәчәк.
Этанол калдыкларыннан саклану ысулы соңгы элитация вакытында ике тапкыр кабатланырга мөмкинкапка капкасыике минут эчендә этанолны тулысынча парга әйләндерергә рөхсәт итәр өчен буфер өстәгәнче.
Ләкин, шуны белергә кирәк: катнашу РНК сыйфатын бәяләү индексы гына.Әгәр дә югарыда телгә алынган операцияләр катгый җайга салынса, катнашу һәм стандарт диапазон арасындагы тайпылыш агымдагы экспериментларга зур йогынты ясамас.
Бәйләнешле продуктлар:
Хайваннарның гомуми РНК изоляциясе комплекты
Totalсемлекнең гомуми РНК изоляциясе комплекты
Күзәнәкнең гомуми РНК изоляциясе комплекты
Totalсемлекнең гомуми RNA изоляциясе комплекты