Туры RT-qPCR комплекты III
Комплект тасвирламасы:
◮Туры RT-qPCR комплекты, Foreasy Reverse Transcriptase һәм Foreasy HS Taq DNA полимеразын кулланып, уникаль реакция буферы белән бу комплектны көчле каршылык һәм яраклашу белән ясый, һәм шаблон буларак Foregene Lysis системасын кулланып реакцияне сынап карый ала.Бу комплект COVID-19 нуклеин кислотасын ачыклау комплекты һәм башка патоген бактерияләр нуклеин кислотасын ачыклау комплекты өчен кулланыла ала.
Тасвирлау
Туры RT-qPCR комплекты аерым пакетланган RT-qPCR буферы белән тәэмин ителә (Foreasy HS Taq DNA полимераз катнашы белән) һәм югары эффективForeasy Reverse Transcriptase (MMLV),гади тикшерү кысаларында арткы комплектлар һәм системаны көйләү өчен уңайлы итү.
Туры RT-qPCR комплекты, Foreasy Reverse Transcriptase һәм Foreasy HS Taq DNA полимеразын кулланып, уникаль реакция буферы белән бу комплектны көчле каршылык һәм яраклашу белән ясый, һәм шаблон буларак Foregene Lysis системасын кулланып реакцияне сынап карый ала.Бу комплект COVID-19 нуклеин кислотасын ачыклау комплекты һәм башка патоген бактерияләр нуклеин кислотасын ачыклау комплекты өчен кулланыла ала.
Бу комплект җиңел һәм тиз кулланып, турыдан-туры IVD продуктының компоненты булырга мөмкин.Аны яңадан тикшермичә, җиңел тикшерү кирәк.
Характеристикалар
500Т, 50,000Т
Комплект компонентлары
| Комплект эчтәлеге (20 μЛ реакция системасы) | IM-05111-03 | IM-05112-03 |
| 500 Т. | 50,000 Т. | |
| Форази Р.Мәңге транскрипт(200 U /μL) | 50 μЛ× 1 | 1 мл× 5 |
| 2 × туры qPCRМикс-Такман | 1 мл × 5 | 500 мл× 1 |
| Инструкция | 1 | 1 |
Эш адымнары
А: Шаблон һәм реагент әзерләү
1. РНК шаблонын әзерләгез (РНК шаблонын чыгару һәм чистарту өчен Foregene Total RNA изоляция комплекты комплектын кулланырга киңәш ителә) яки яраклаштыру продукты (Foregene Lysis системасын кулланырга киңәш ителә), махсус праймериз (10 μM) һәм башка кирәкле куллану, инструмент.
2. 2 × туры RT-qPCR буферы, RNase-ddH2O һәм 20 × ROX белешмә буягы (кирәк булса) сандыкка боз белән салыгыз, бу табигый рәвештә эреп, йомшак катнаш.
Б: RT-qPCR системасын әзерләү
Реакция системасының реакция буферының ярты күләмен алыгыз (мәсәлән, система күләме 20 μЛ булса, аңа 10 μL 2 × туры RT-qPCR буферы алырга кирәк)). Өчентиешле фермент, без тәкъдим итәбезM-MLV ： 10-30 U / 20 μL реакция системасы,ТакДНК полимерасы：1-2 U / 20 μL реакция системасыбу безнең тәкъдим, сез аны сынап карарга тиеш), РНК шаблонын, махсус праймерларны һәм пробаларны өстәргә, һәм RNase-Free ddH өстәргә2О - 20 μЛ.RT-qPCR реакция системасының конкрет әзерлеген түбәндәге таблицага юнәлтергә мөмкин.
Таблица 1: RT-qPCR системасын әзерләү
| Компонент | Том | Соңгы концентрация |
| 2 × Туры RT-qPCR Буфер | 10 μЛ | 1 × |
| Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV) | 10-30 U. | |
| Foreasy HS Taq DNA полимерасы | 1-2 U. | |
| Алга Праймер (10 μM) | 0,8 μЛ | 50-900nM |
| Кире пример (10 μМ) | 0,8 μЛ | 50-900nM |
| Проб (4 μM) | 1 μЛ | 200нМ |
| Шаблон (РНК яки Лизат) | X μL | |
| 20 × ROX сылтама буяу | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Гомуми күләм | 20 μЛ |
Искәрмә: Алга Пример һәм Кире Пример - максатлы генның махсус праймериз.QPCR системасы практик эксперименталь һәм PCR модельләре буенча көйләнергә мөмкин.Күпчелек праймерларның соңгы концентрациясе өчен 400nM тәкъдим итәбез.Конкрет концентрация һәм тәкъдим ителгән соңгы концентрация буенча конкрет праймериз һәм пробларның күләмен көйләгез, зинһар.
1 *: Төрле санлы PCR кораллары буенча ROX белешмә буяуның соңгы концентрациясен сайлагыз.Гомуми санлы PCR коралларының оптималь ROX сылтамасы буяу концентрациясе түбәндәге таблицада күрсәтелгән:
| Санлы PCR кораллары | ROX белешмә буяуның соңгы концентрациясе |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT / Беренче адым,һ.б. | 1 × (мәсәлән, 20 μL реакция системасына 1μl 20 × ROX сылтама буягы өстәргә) |
| ABI 7500, 7500 Тиз, Стратаген Mx3000P, Mx3005P һәм Mx4000 һ.б. | 0,5 × (мәсәлән, 20 μЛ реакция системасына 0,5μl 20 × ROX белешмә буяу кушыгыз) |
| Roche PCR инструменты, Bio-Rad PCR инструменты, Eppendorf санлы PCR инструменты һ.б. | ROX сылтама буяусыз |
Саклау һәм саклану вакыты
Комплект -20 ± 5 at сакланырга тиеш.Аны шунда ук -20 ℃ термостатик суыткычта сакларга кирәк.Әгәр дә тиешле шартларда сакланса, куллану вакыты 2 ел.
