СорауларХайваннарның гомуми РНК изоляциясе комплекты

Сез очратырга мөмкин булган проблемаларга түбәндәге анализхайван тукымасы / күзәнәк РНК чыгару will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

РНК чыгарылмый яки РНК уңышлары аз

Бетерү эффективлыгына еш йогынты ясаучы төрле факторлар бар, мәсәлән: тукымалар үрнәге РНК эчтәлеге, эш ысулы, элитация күләме һ.б.

1. Боз мунчасы яки криогеник (4 ° C) центрифугация операция вакытында башкарылды.

Реклама: Бүлмә температурасында (15-25 ° C) эшләгез, түбән температурада боз мунчасын һәм центрифуга куймагыз.

2. Начар үрнәкне саклау яки артык үрнәк саклау вакыты.

Реклама: -80 ° C үрнәкләрен саклагыз яки сыек азотта туңдырыгыз һәм кат-кат туңдырудан сакланыгыз.РНК алу өчен яңа тукыманы яки культуралы күзәнәкләрне кулланырга тырышыгыз.

3. Лизис үрнәге җитәрлек түгел.

Тәкъдим итү: Гомогенизация тукымасы булганда, тукыманың җитәрлек гомогенизацияләнүен һәм тукымалар күзәнәкләренең РНК чыгарылышын аңлату өчен җитәрлек бүленүен тәэмин итегез.

4. Элуент дөрес кушылмый.

Реклама: RNase-ddH булуын раслагыз₂O чистарту баганасы мембранасы уртасына тамчы тамчы өстәлә.

5. Буфер RL2 яки Буфер RW2 өчен абсолют этанолның дөрес күләме кушылмады.

Реклама: Инструкцияне үтәгез, буфер RL2 һәм Буфер RW2-ка дөрес күләмле абсолют этанол кушыгыз һәм комплектны кулланганчы яхшылап кушыгыз.

6. Кисем үрнәге дозасы урынлы түгел.

Реклама: 10-20 мг тукыманы яки (1-5) × 10 кулланыгыз⁶500 μл буфер RL1 күзәнәкләре, чөнки тукымаларны артык куллану РНК чыгаруны киметергә мөмкин.

7. Дөрес булмаган элитация күләме яки тулы булмаган элитация.

Реклама: Чистарту баганасының элитация күләме 50-200 μл;элитация эффекты канәгатьләнерлек булмаса, җылытылган RNase-Free ddH кушылганнан соң бүлмә температурасын урнаштыру вакытын озайтырга киңәш ителә.₂О, мәсәлән, 5-10 минут.

8. Чистарту баганасында буфер RW2 юылганнан соң этанол калдыклары бар.

Реклама: Буфер RW2 юылганнан соң этанол калдыклары булса, 1 минутка буш торба центрифугациясе булса, буш трубаны центрифугация вакыты 2 минутка арттырылырга мөмкин, яисә чистарту баганасы бүлмә этанолын 5 минутка урнаштырырга мөмкин.

Чистартылган РНК бозыла

Чистартылган РНКның сыйфаты үрнәкне саклау, RNase пычрануы, манипуляция һ.б. кебек факторлар белән бәйле.

1. Кисем үрнәкләре вакытында сакланмый.

Реклама: Әгәр тукымалар үрнәкләре яки күзәнәкләр җыелганнан соң вакытында кулланылмаса, шунда ук крипопрезерв -80 ° C яки сыек азот.РНКны чыгару өчен, мөмкин булган вакытта яңа алынган тукыманы яки күзәнәк үрнәген кулланыгыз.

2. Тукымалар үрнәкләрен кат-кат туңдыру.

Реклама: тукымалар үрнәкләрен саклаганда, аларны саклау өчен кечкенә кисәкләргә бүлеп, үрнәкне кат-кат туңдыру һәм РНК деградациясен булдырмас өчен кулланганда иң яхшысы.

3. Операция вакытында RNase кертелә яки бер тапкыр кулланыла торган перчаткалар, битлекләр һ.б.

Реклама: РНК алу экспериментлары иң яхшы РНК манипуляция бүлмәләрендә башкарыла һәм эксперимент алдыннан таблицаны чистарталар.

Эксперимент вакытында бер тапкыр кулланыла торган перчаткалар һәм битлекләр киегез, RNase кертү аркасында килеп чыккан РНК деградациясен киметү өчен.

4. Реагентлар куллану вакытында RNase белән пычранган.

Реклама: Бәйләнешле экспериментлар өчен яңа хайваннарның гомуми RNA изоляциясе комплекты белән алыштырыгыз.

5. РНК манипуляциясендә кулланылган центрифуга трубалары, киңәшләр һ.б. RNase белән пычранган.

Реклама: РНК чыгаруда кулланылган центрифуга трубалары, киңәшләр, пипеталар һ.б. барысы да RNase-Free булуын раслагыз.

Чистартылган РНК түбән агымдагы экспериментларга тәэсир итә

Чистарту баганасы белән чистартылган РНК, тоз ионнары булса, протеинның күләме бик зур булса, агымдагы экспериментка тәэсир итәчәк, мәсәлән: кире транскрипция, Төньяк Блот һ.б.

1. РНКның тозлы ион калдыклары бар.

Реклама: Буфер RW2-ка дөрес этанол кушылганын раслагыз һәм операция өчен күрсәтелгән центрифугаль тизлектә 2 чистарту баганасын юыгыз.тоз ионы калдыклары булса, чистарту колонкасын буфер RW2 бүлмә температурасында 5 минутка калдырыгыз һәм тоз пычрануны максимумлаштыру өчен центрифугация эшләгез.

2. РНКда этанол калдыклары.

Реклама: Буфер RW2 юылганнан соң, буш торбаны центрифугация операциясен башкару өчен күрсәтелгән центрифугация тизлегендә эшләгез, этанол калдыклары булса, буш торбаны центрифугацияләү вакытын 2 минутка арттырыгыз, яки этанол калдыкларын максимумлаштыру өчен буш температурада 5 минутка калдырыгыз.

Нульсей кислотасы үрнәк төрләрен изоляцияләү

Форгенның РНК изоляциясе комплектлары түбәндәге үрнәк соуслардан тулы РНК изоляциясе / чыгаруны ала ала: Хайваннар тукымасы, үсемлек, күзәнәкләр, вирус, кан һ.б.

Мин комплектны ничек саклыйм

Бүлмә температурасын 24 ай саклау.