Антителалар, шулай ук ​​иммуноглобулиннар (Ig) дип аталалар, гликопротеиннар, антиген белән махсус бәйләнгәннәр.
 
Гадәттәге антитела әзерләү хайваннарны иммунизацияләү һәм антисерум җыю белән ясала.Шуңа күрә, антисерумда гадәттә башка бәйләнешсез антигеннәргә һәм зарардагы башка протеин компонентларына каршы антителалар бар.Гомуми антиген молекулалары күбесенчә төрле эпитопларны үз эченә ала, шуңа күрә гадәти антителалар шулай ук ​​берничә төрле эпитопларга каршы антителалар катнашмасы.Хәтта бер үк эпитопка каршы юнәлтелгән гадәти зарум антителалары әле дә төрле В күзәнәк клоннары җитештергән гетероген антителалардан тора.Шуңа күрә гадәти зарарлы антителалар шулай ук ​​поликлональ антителалар яки кыска вакыт эчендә поликлональ антителалар дип атала.
 
Моноклональ антитела (моноклональ антитела) - бер В күзәнәк клоны җитештергән һәм билгеле бер эпитопка каршы юнәлтелгән югары бертөрле антитела.Бу гадәттә гибридома технологиясе белән әзерләнә - гибридома антитела технологиясе күзәнәк кушылу технологиясенә нигезләнеп, В күзәнәкләрен билгеле антителалар һәм миелома күзәнәкләрен В-күзәнәк гибридомасына чиксез үсү сәләте белән берләштерә.Бу гибридома күзәнәге төп күзәнәкнең үзенчәлекләренә ия.Ул миелома күзәнәкләре кебек витрода чиксез һәм үлемсез таралырга мөмкин, һәм ул спленик лимфоцитлар кебек махсус антителаларны синтезлый һәм яшерә ала.Клонлаштыру аша бер гибридома күзәнәгеннән алынган моноклональ сызык, ягъни гибридома күзәнәк линиясе алырга мөмкин.Ул җитештергән антителалар бер үк антигеник детерминантка, ягъни моноклональ антителаларга каршы бик гомоген антителалар.
 
Антителалар бер яки берничә Y формасындагы мономерлар булып торалар (ягъни моноклональ антителалар яки поликлональ антителалар).Y формасындагы һәр мономер 4 полипептид чылбырыннан тора, шул исәптән ике охшаш авыр чылбыр һәм ике охшаш яктылык чылбыры.Lightиңел чылбыр һәм авыр чылбыр аларның молекуляр авырлыгына карап атала.Y формасындагы структураның өске өлеше - үзгәрүчән төбәк, ул антиген бәйләүче мәйдан.(Детай био-моноклональ антитела концепциясеннән өзек)
 
Антитело структурасы
Авыр чылбыр
Грек хәрефләре белән аталган α, δ, ε, γ, μ биш имезүчеләрнең авыр авыр чылбырлары бар.Тиешле антителалар IgA, IgD, IgE, IgG һәм IgM дип атала.Төрле авыр чылбырлар зурлыгы һәм составы белән аерылып торалар.α һәм γ якынча 450 аминокислотаны үз эченә ала, ә μ һәм ε якынча 550 аминокислотаны үз эченә ала.
Eachәрбер авыр чылбырның ике төбәге бар: даими төбәк һәм үзгәрүчән төбәк.Бер үк типтагы барлык антителалар бер үк даими регионга ия, ләкин төрле типтагы антителалар арасында аерма бар.Heavy, α, δ авыр чылбырларның даими регионнары тандемда өч Ig доменыннан тора, аның сыгылмалылыгын арттыру өчен элмә өлкәсе бар;авыр чылбырларның даими өлкәләре μ һәм ε 4 Ig доменнарыннан тора.Төрле В күзәнәкләре җитештергән антителаның авыр чылбырының үзгәрү өлкәсе төрле, ләкин бер үк В күзәнәк яки күзәнәк клоны җитештергән антителаның үзгәрү өлкәсе бер үк, һәм һәр авыр чылбырның үзгәрүчән өлкәсе озынлыгы 110 аминокислоталар., Һәм бер Ig доменын формалаштыру.
 
Lightиңел чылбыр
Имезүчеләрдә ике төрле җиңел чылбыр бар: ламбда тибы һәм каппа тибы.Eachәрбер яктылык чылбырының ике бәйләнгән домены бар: даими төбәк һәм үзгәрүчән төбәк.Яктылык чылбырының озынлыгы якынча 211 ~ 217 аминокислоталар.Antәр антителадагы ике җиңел чылбыр һәрвакыт бер үк.Имезүчеләр өчен, һәр антителадагы яктылык чылбырының бер төре бар: каппа яки ламбда.Кайбер түбән умырткалы хайваннарда, мәсәлән, кариллагин балыклары (кычыткан балыклары) һәм сөякле балыклар, йота (йота) кебек башка җиңел чылбырлар да очрый.
 
Fab һәм Fc сегментлары
Fc сегменты ферментлар яки флюоресцент буяулар белән турыдан-туры кушылырга мөмкин, антителаларны билгеләргә.Бу ELISA процессында антитела тәлинкәгә бәрелгән өлеш, һәм ул шулай ук ​​икенче антитела танылган һәм иммунопрепипитация, иммуноблоттинг һәм иммунохистохимия белән бәйләнгән өлеш.Антителалар ике F (ab) сегментына һәм бер Fc сегментына папаин кебек протеолитик ферментлар белән гидролизацияләнергә мөмкин, яисә алар элмә өлкәсеннән пепсин белән өзелергә һәм бер F (ab) 2 сегментына һәм бер Fc сегментына гидролизацияләнергә мөмкин.IgG антитела фрагментлары кайвакыт бик файдалы.Fc сегменты булмаганлыктан, F (ab) сегменты антиген белән яумаячак, һәм виво тикшеренүләрендә иммун күзәнәкләр тарафыннан кулга алыначак.Кечкенә молекуляр фрагментлар һәм үзара бәйләү функциясе булмаганлыктан (Fc сегменты булмау аркасында), Fab сегменты гадәттә функциональ тикшеренүләрдә радиоэлемтә өчен кулланыла, һәм Fc сегменты, нигездә, гистохимик буяуда блоклаучы агент буларак кулланыла.
 
Variзгәрешле һәм даими төбәкләр
Changeзгәрешле төбәк (V өлкәсе) H чылбырының 1/5 яки 1/4 (якынча 118 аминокислота калдыкларын үз эченә ала) N-терминус янында һәм 1/2 (якынча 108-111 аминокислота калдыкларын үз эченә алган) L чылбырының N-терминалы янында урнашкан.Eachәр V төбәгендә чылбыр эчендәге диффид бәйләнешләре формалашкан пептид боҗрасы бар, һәм һәр пептид боҗрасында якынча 67-75 аминокислота калдыклары бар.V төбәгендәге аминокислоталарның составы һәм урнашуы антителаның бәйләүче үзенчәлеген билгели.V төбәгендә гел үзгәреп торган төрләр һәм аминокислоталар эзлеклелеге аркасында, төрле бәйләүче антиген үзенчәлекләре булган күп төрле антителалар барлыкка килергә мөмкин.L чылбырының V өлкәләре һәм H чылбыры VL һәм VH дип атала.VL һәм VHда аминокислота составы һәм кайбер җирле төбәкләрнең эзлеклелеге югары үзгәрү дәрәҗәсенә ия.Бу төбәкләр гипервариаль төбәкләр (HVR) дип атала.V төбәгендә аминокислота составы һәм HVR булмаган өлешләрнең урнашуы чагыштырмача консерватив, ул челтәр өлкәсе дип атала.VLда өч гипервариаль регион бар, гадәттә 24 - 34 һәм 89 - 97 аминокислота калдыкларында.VL һәм VH өч HVR тиешенчә HVR1, HVR2 һәм HVR3 дип атала.Рентген кристалл дифракциясен тикшерү һәм анализлау гипервариаль төбәкнең чыннан да антиген антиген бәйләгән урыны булуын раслады, шуңа күрә ул тулыландыручы билгеләү өлкәсе (CDR) дип атала.VL һәм VHның HVR1, HVR2 һәм HVR3 тиешенчә CDR1, CDR2 һәм CDR3 дип аталырга мөмкин.Гадәттә, CDR3 гипервариальлекнең югары дәрәҗәсенә ия.Гипервариаль төбәк шулай ук ​​Иг молекулаларының идиотипик детерминантлары булган төп урын.Күпчелек очракта H чылбыры антиген белән бәйләнештә мөһимрәк роль уйный.
Даими төбәк (С өлкәсе)H терминалының 3/4 яки 4/5 (якынча 119 аминокислотадан C терминалына кадәр) C терминалы янында һәм L чылбырының C терминалы янында 1/2 (якынча 105 аминокислота калдыклары бар).H чылбырының һәр функциональ төбәгендә якынча 110 аминокислота калдыклары бар, һәм аларда пульфид боҗрасы бар, диффид бәйләнешләре белән тоташтырылган 50-60 аминокислота калдыкларыннан.Бу төбәктә аминокислота составы һәм урнашуы бер үк хайван Ig изотипы L чылбырында һәм бер үк H чылбырында чагыштырмача даими.Шул ук, ул махсус антиген белән генә бәйләнә ала, ләкин аның С өлкәсенең структурасы бер үк, ягъни антигенитик бер үк.Ат кешегә каршы IgG икенчел антитела (яки анти-антитела) ике кушылырга мөмкин Антителла (IgG) төрле экзотоксиннарга каршы.Бу икенчел антителалар әзерләү һәм флуоресейн, изотоплар, ферментлар һәм башка маркалы антителалар куллану өчен мөһим нигез.
 
 
Бәйләнешле продуктлар:
Күзәнәк туры RT-qPCR комплекты