Ишетү югалту (HL) - кешеләрдә иң еш очрый торган сенсор инвалидлыгы.Алга киткән илләрдә балаларда саңгырау авыруларның якынча 80% генетик факторлар аркасында килеп чыга.Иң еш очрый торган бер ген җитешсезлекләре (1 нче рәсемдә күрсәтелгәнчә), 124 ген мутациясе кешеләрдә нонсиндром ишетү югалуы белән бәйле, калганнары экологик факторлар аркасында килеп чыккан.Кохлеар имплант (ишетү нервына электр стимуляциясен бирә торган эчке колакка урнаштырылган электрон җайланма) каты HL-ны дәвалау өчен иң эффектив вариант, ә ишетү җайланмасы (тавыш дулкыннарын үзгәртә һәм көчәйтә торган тышкы электрон җайланма) уртача HL авыруларына булыша ала.Ләкин, хәзерге вакытта нәселдән булган HL (GHL) дәвалау өчен дарулар юк.Соңгы елларда ген терапиясе эчке колак җитешсезлеген дәвалау өчен өметле караш буларак арта бара.

1 нче рәсем.Саңгырау белән бәйле вариация төрен тарату. [1]

Күптән түгел Сальк институты һәм Шеффилд университеты галимнәре молекуляр терапия - методлар һәм клиник үсеш [2] тикшеренү нәтиҗәләрен бастырдылар, бу нәсел саңгырау виво ген терапиясенең киң кулланылыш перспективаларын күрсәтте.Сальк институтының фәнни-тикшеренү профессоры һәм Виттның биофотоника үзәге директоры Ури Манор үзенең ишетү сәләтен югалту белән туганын һәм ишетүне торгызуның искиткеч бүләк булачагын сизгәнен әйтте.Элеккеге тикшеренүләре ачыклаганча, Eps8 - актин бәйләүче һәм каплау эшчәнлеге булган актин көйләүче протеин.кохлеар чәч күзәнәкләрендә, MYO15A, WHIRLIN, GPSM2 һәм GNAI3 белән Eps8 формалашкан протеин комплексы, күбесенчә, озын стереоцилия киңәшләре бар, алар MYO15A белән бергә BAIAP2L2 локализациялиләр, кыска стереосилия очларында.Шуңа күрә, Eps8 чәч күзәнәкләренең стереоцилия озынлыгын көйли ала, бу гадәти ишетү функциясе өчен кирәк;Eps8 бетерү яки мутация кыска стереоцилиягә китерәчәк, бу тавышны ми сизү өчен электр сигналларына дөрес үзгәртә алмый, бу үз чиратында саңгырауга китерә..Шул ук вакытта, Шеффилд университеты профессоры Валтер Маркотти Eps8 булмаганда чәч күзәнәкләренең гадәти үсеш ала алмавын ачыклады.Бу тикшеренүдә, Манор һәм Маркотти берләштеләр, стереокилиар күзәнәкләргә Eps8 кушу аларның функциясен торгызырга һәм үз чиратында тычканнарда ишетүне яхшырта аламы-юкмы икәнлеген тикшерергә.Тикшеренү төркеме адено белән бәйле вирус (AAV) Anc80L65 векторын кулланды, кыргый типтагы EPS8 булган кодлаштыру эзлеклелеген Eps8 - / - яңа туган P1-P2 тычканнары түгәрәк тәрәзә мембранасы инъекциясе ярдәмендә;тычкан кохлеар чәч күзәнәкләрендә стереоцилия функциясе җитлеккәнче ремонтланган;һәм ремонт эффекты сурәтләү технологиясе һәм стереосилияне үлчәү белән аерылып торды.Нәтиҗә күрсәткәнчә, Eps8 стереосилия озынлыгын арттырган һәм аз ешлыклы күзәнәкләрдә чәч күзәнәкләренең функциясен торгызган.Алар шулай ук ​​вакыт узу белән күзәнәкләрнең бу ген терапиясе белән коткару сәләтен югалтканнарын ачыкладылар.Моның нәтиҗәсе шунда: бу дәвалауны утерода кулланырга кирәк булырга мөмкин, чөнки Eps8 - / - чәч күзәнәкләре өлгергән яки тычканнар тугач ремонттан тыш зыян туплаган булырга мөмкин."Eps8 - күп төрле функцияле протеин, һәм әле күп нәрсәне өйрәнергә кирәк", диде Манор.Киләчәк тикшеренүләр Eps8 ген терапиясенең төрле үсеш этапларында ишетүне торгызуга тәэсирен һәм дәвалау мөмкинлекләрен озайту мөмкинлеген тикшерүне үз эченә ала.Очраклы рәвештә, 2020 елның ноябрендә Израильнең Тель-Авив университеты профессоры КаренБ Аврахам үз нәтиҗәләрен EMBO Молекуляр Медицина журналында бастырып чыгарды, инновацион ген терапиясе технологиясен кулланып, зарарсыз синтетик адено белән бәйле вирус AAV9-PHP.В, Syne4 - / - тычканнарның чәч күзәнәкләрендәге ген җитешсезлеге Syne4 кодлаштыру эзлеклелеген тычканнарның эчке колагына кертеп, чәч күзәнәкләренә керергә һәм йөртелгән генетик материалны чыгарырга мөмкинлек бирде (2 нче рәсемдәгечә).

2 нче рәсем.Эчке колак анатомиясенең схематик чагылышы, Корти организмына һәм несприн-4 кәрәзле функциясенә игътибар итеп.

Күрергә була, ген терапиясен куллану нәсел авыруларын ген дәрәҗәсендә дәвалау максатыннан ирешү өчен, мутацияләнгән геннарны дәвалау, ягъни дәвалау өчен (ягъни авыруның генетик үзгәрешләрен контрольдә тоту) югары клиник эффектка ия.куллану перспективалары.Генетик дефицит саңгырау өчен хәзерге ген терапия ысулларын түбәндәге категорияләргә бүлеп була:

ген алыштыру

Генны алыштыру - бәхәссез ген терапиясенең иң "туры" формасы, кимчелекле генны ачыклау һәм генның гадәти яки кыргый типтагы күчермәсе белән алыштыру нигезендә.Весикуляр глютамат ташучы 3 (VGLUT3) генны бетерү аркасында ишетелгән югалту өчен беренче уңышлы эчке колак ген терапиясе.Эчке колак чәч күзәнәкләрендә (IHC) экзоген VGLUT3 чиктән тыш кысылу AAV1-арадашлы ишетү торгызылуга, тасма синаптик морфологиянең өлешчә торгызылуына һәм конвульсив җавапларга китерергә мөмкин [4].Ләкин, югарыдагы кереш сүздә тасвирланган ике AAV китерелгән ген алмаштыруны үз эченә алган мисалларда, шуны әйтергә кирәк: ген бетерү өчен нәселдән булган ишетү югалту бозу өчен кулланылган тычкан модельләре кешеләрдән вакытлыча аерылып тора, һәм P1 тычканнарында эчке колак үсешнең җитлеккән этабында.Киресенчә, кешеләр җитлеккән эчке колак белән туалар.Бу аерма тычкан нәтиҗәләрен кеше нәселеннән булган саңгырау авыруларын дәвалауда кулланырга комачаулый, ген терапиясе җитлеккән тычкан колакларына китерелмәсә.

Ген редакцияләү: CRISPR / Cas9

"Ген алыштыру" белән чагыштырганда, ген редакцияләү технологиясе үсеше тамырдан генетик авыруларны дәвалау таңын китерде.Иң мөһиме, ген редакцияләү ысулы традицион чиктән тыш кысылу ген терапиясе ысулларының җитешсезлекләрен каплый, алар доминант нәселдән саңгырау авыруларына яраксыз, һәм чиктән тыш кысу ысулы озакка сузылмаган проблема.Кытай тикшерүчеләре Myo6WT / C442Y тычканнарында Myo6C442Y мутант аллеле AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2 ген редакцияләү системасын кулланып, ноктадан соң 5 ай эчендә тычканнар Модельнең ишетү функциясе торгызылды;шул ук вакытта эчке колактагы чәч күзәнәкләренең исән калу дәрәҗәсе яхшыруы, силия формасы регулярлашуы һәм электрофизиологик күрсәткечләр төзәтелүе күзәтелде [5].Бу дөньяда CRISPR / Cas9 технологиясен Myo6 ген мутациясе аркасында килеп чыккан нәсел саңгырау дәвалау өчен кулланган беренче тикшеренү, һәм бу нәселдән саңгырау дәвалау өчен ген редакцияләү технологиясенең мөһим тикшеренү прогрессы.Дәвалауның клиник тәрҗемәсе нык фәнни нигез бирә.

Ген терапиясен китерү ысуллары

Ген терапиясе уңышлы булсын өчен, ялангач ДНК молекулалары гидрофиликлыгы һәм фосфат төркемнәренең тискәре корылмасы аркасында күзәнәкләргә эффектив үтеп керә алмыйлар, һәм тулыландырылган нуклеин кислотасы молекулаларының тулылыгын тәэмин итү өчен куркынычсыз һәм эффектив ысул сайланырга тиеш.Өстәмә ДНК максатлы күзәнәккә яки тукымага китерелә.AAV югары инфекцион эффект, иммуногенитет түбән, төрле тукымаларга киң тропизм аркасында авыруларны дәвалау өчен киң кулланыла.Хәзерге вакытта зур тикшеренү органы тычкан кохлеясындагы төрле күзәнәк төрләренә караганда AAVның төрле типларының тропизмын билгеләде.AAV тапшыру характеристикаларын куллану, күзәнәккә хас промоутерлар белән берлектә, күзәнәккә хас булган экспресска ирешә ала, бу максатсыз эффектларны киметә ала.Моннан тыш, традицион AAV векторларына альтернатива буларак, яңа синтетик AAV векторлары даими эшләнәләр һәм эчке колакта өстен үткәрү сәләтен күрсәтәләр, алар арасында AAV2 / Anc80L65 иң киң кулланыла.Вируссыз тапшыру ысулларын алга таба физик ысулларга (микроинжекция һәм электропорация) һәм химик ысулларга (липид нигезендә, полимер һәм алтын нанопартиклар) бүләргә мөмкин.Ике алым да нәселдән саңгырау авыруларын дәвалауда кулланылган һәм төрле өстенлекләр һәм чикләүләр күрсәткән.Ген терапиясе өчен транспорт чарасы буларак, виво ген белән идарә итүдә төрле максатлы күзәнәк төрләренә, идарә итү маршрутларына һәм терапевтик эффективлыкка нигезләнеп кулланырга мөмкин.Эчке колакның катлаулы структурасы максат күзәнәкләренә ирешүне кыенлаштыра һәм геном редакцияләү агентларының таралуы әкрен бара.Мембранлы лабиринт вакытлы сөякнең сөяк лабиринтында урнашкан һәм кохлеар канал, ярымтүгәрәк канал, утрик һәм шарны үз эченә ала.Аның чагыштырмача изоляциясе, минималь лимфатик әйләнеше, каннан лабиринт барьеры белән аерылуы терапевтиканың эффектив системалы неонаталь тычканнарга китерелүен чикли.Ген терапиясе өчен яраклы вируслы титерлар алу өчен, вирус векторларын эчке колакка туры инъекцияләү кирәк.Билгеләнгән инъекция маршрутларына түбәндәгеләр керә:

3 нче рәсем.Ген терапиянең эчке колак китерү.

Ген терапиясендә күп алга китешләр булса да, клиник тәрҗемә максатларына нигезләнеп, ген терапиясе генетик авырулар белән авыручылар өчен беренче чиратта дәвалау варианты булып киткәнче, аеруча куркынычсыз һәм эффектив векторлар һәм тапшыру ысулын үстергәнче, күбрәк эшләргә кирәк.Ләкин без якын киләчәктә бу төр дәвалау персональ терапиянең төп өлешенә әйләнәчәк һәм генетик бозулар булган кешеләрнең һәм аларның гаиләләренең тормышына бик уңай йогынты ясар дип ышанабыз.

Foregene шулай ук ​​максатчан геннар өчен югары үткәргеч скринка комплектын эшләтеп җибәрде, ул тиз һәм кире транскрипция һәм qPCR реакцияләрен РНК чыгармыйча башкара ала.

Продукция сылтамалары

Күзәнәк туры RT-qPCR комплекты - Такман / СЫБР Яшел I.

Күбрәк продукт турында мәгълүмат алу өчен зинһар:

overseas@foregene.com