Эксперимент персоналының тәртибен стандартлаштыру өчен PCR эксперимент SOP булдыру.
Эксперимент операция процедураларын катгый үтәп, PCR пычрануын минимальләштерә, бу кеше факторлары аркасында булырга мөмкин яки пычрану килеп чыкмасын.Моннан тыш, эксперимент тиешле профессиональ белем һәм күнекмәләргә ия булырга тиеш, шул исәптән җиһаз белән эш итү, бөтен эш процессын ачыклау, пычратуның дәвалау ысулларын һәм лаборатория сыйфатын контрольдә тоту ысулларын үзләштерү, һәм тест нәтиҗәләрен дөрес аңлата белү.
Стандарт PCR лабораториясен булдыру.
PCR лабораториясе принцип буенча дүрт юнәлешкә бүленә, ягъни реагент әзерләү өлкәсе, үрнәк эшкәртү өлкәсе, көчәйтү өлкәсе һәм продуктны анализлау өлкәсе.Беренче ике өлкә - көчәйтү алдыннан, соңгы ике өлкә - көчәйтүдән соңгы өлкәләр.Көчәйтү алдыннан зона һәм көчәйтүдән соңгы зона катгый аерылырга тиеш.Эксперименталь материаллар, реагентлар, язу кәгазе, ручкалар, чистарту материаллары һ.б. көчәйтү алдыннан мәйданнан көчәйтүдән соң гына, ягъни реагент әзерләү өлкәсеннән, үрнәк эшкәртү өлкәсеннән, көчәйтү өлкәсеннән, көчәйтү продуктларын анализлау өлкәсеннән, һәм артка агып китмәскә тиеш.Лабораториядәге һава агымы көчәйтү алдыннан мәйданнан көчәйтүдән соң булырга тиеш, һәм артка түгел.Идеаль PCR лабораториясе дизайны түбәндә күрсәтелгән:
Рәсем А: Буфер бүлмәсендә тискәре басым белән идеаль PCR лабораториясен урнаштыру режимы
Рәсем В: Буфер бүлмәсендә уңай басымлы идеаль PCR лабораториясен урнаштыру режимы
PCR лабораториясен урнаштыру схемалары А һәм В рәсемнәрендә бирелгән идеаль көйләү режимы булырга тиеш, һәм шартлы лаборатория дизайн өчен бу режимга мөрәҗәгать итә ала.Гади лабораторияләр өчен PCR көчәйтү өлкәсен һәм продукт анализлау өлкәсен аерырга киңәш ителә, һәм үрнәкне әзерләү өлкәсендә һәм PCR көчәйтү өлкәсендә каплауны ачу мөмкин кадәр киметелергә тиеш.Исегездә тотыгыз: продукт анализлау өлкәсендәге продуктлар һәм эксперименталь әйберләр үрнәк әзерләү өлкәсенә һәм PCR көчәйтү өлкәсенә алып бару катгый тыела.
Лаборатория PCR ачыклау һәм идентификацияләү генә башкарса, гадәти PCR урынына флуоресцент санлы PCR кулланырга киңәш ителә.
Флуоресцент санлы PCR ачыклау нәтиҗәләре флуоресцент сигналлар белән җыелып анализлана ала, шуңа күрә реакциядән соң электрофорез өчен капкачны ачарга кирәкми, бу реакция продуктларының аэрозоллар барлыкка килүеннән килеп чыккан PCR продуктларын пычратудан саклый.Гель электрофорезын йөкләү адымында капка ачу санын арттырсагыз, аэрозол белән пычрану булырга мөмкин.Санлы PCR куллануны алга этәрү һәм әкренләп сыйфатлы PCR алыштыру тәкъдим ителә.
PCR реакциясе өчен UNG анти-PCR продуктларын пычрату системасы кулланыла.
Система dTTP урынына dUTP куллана.PCR реакциясеннән соң, барлык PCR продуктлары (ДНК фрагментлары) dUTP белән кертелә;PCR реакциясенең чираттагы турында, системага кушылган UNG ферменты PCR алдыннан 5 минут эчендә 37 ° C инкубацияләнә, ул DUTP булган барлык ДНК фрагментларын махсус деградацияли ала, аннары PCR реакциясен башкара ала.Бу PCR продуктлары китергән аэрозол пычрануны тулысынча бетерә ала.Эффект түбәндәге рәсемдә күрсәтелгән:
Искәрмә: туры PCR сериясе өчен, сез Foregene-ның анти-PCR продуктларын пычрату системасының продуктларын сайлый аласызТәкъдим итегез
Зур масштаблы генотиплау сынаулары үткәргән лабораторияләр өчен, акыллы лабораторияләр төзелешенә өстәп, реагентларны сынау өчен UNG анти-PCR продуктларын пычрату системасын куллану киңәш ителә.
Искә төшерү: Бу системаны куллану PCR продуктының пычрануын бетерә алмый.Шуңа күрә, UNG системасы тиешле сынау башында кулланылырга тиеш, һәм PCR продуктларын пычратмас өчен, UNG системасы PCR көчәйтү өчен кулланылырга тиеш.
Зур масштаблы тест үткәргәндә Foregene туры PCR-UNG системасын кулланырга киңәш ителә, мәсәлән:
Plantсемлек яфрагы туры PCR комплекты-UNG ；
Antсемлек орлыгы туры PCR комплекты-UNG ；
Хайваннар тукымасы туры PCR комплекты-UNG ；
Тычкан койрыгы туры PCR комплекты-UNG ；
Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG。
Форгеннан бу комплектларPCR ачыклауны тиз һәм зур масштабта гына башкара алмый, шулай ук PCR продуктларының пычрануын эффектив кисәтә һәм контрольдә тота.
Пост вакыты: 19-2021 март
